二甲基亞砜(DMSO)是一種含硫有機化合物,分子式爲(CH3)2SO,常溫下爲無色無臭的透明液體。DMSO作爲冷凍(dòng)保護劑經常應用於(yú)細胞庫。在細胞冷凍(dòng)過程中,DMSO可防止胞内/胞外晶體的形成,其工作濃度爲10%。DMSO通常可與鹽或血清白蛋白結合。
疏水性多肽可以很容易地溶解在DMSO中。但DMSO可增加細胞的通透性,若多肽溶解於DMSO中則會對細胞産生毒性作用。高濃度的DMSO絕不可應用於細胞培養中。濃度爲5%的DMSO即可讓細胞膜溶解。大多數細胞株可以容忍0.5% DMSO,少許可以容忍1%的濃度,而不表現出嚴重的細胞毒性。然而原代細胞培養對其更敏感。所以如果是用原代細胞做劑量/反應曲線(可行性),其濃度應低於0.1%。
對於(yú)某些疏水性非常高的多肽,可先嘗試将其溶解在少量的DMSO(30-50ul,100%)中,然後慢慢 (一滴一滴地)将其添加到不斷攪拌的水溶液如PBS或其他想要的緩沖液中,直至理想濃度。如果滴加過程中,肽溶液開始變渾濁,說明已經達到瞭(le)溶解極限。另外,超聲波有助於(yú)多肽溶解。
經驗:
對(duì)幾(jǐ)乎所有的細胞來說,濃度爲0.1%DMSO是安全的。
廣(guǎng)泛被用於(yú)細胞培養的DMSO終濃度爲0.5%,不會引起細胞毒性。
雖然對(duì)部份細胞來說,1%DMSO也不會産(chǎn)生細胞毒性,但我們推薦0.5%。
也有5%DMSO成功地應用於(yú)某些細(xì)胞的案例。
始終保持終濃度在0.5%,但儲(chǔ)存時可200倍高濃度溶於(yú)100%的DMSO中。