用哪種溶劑溶解合成肽一直是困擾多肽工作者的一個難題。根據不同的氨基酸序列,可以參考以下方法來溶解合成肽。最好是先将少量肽用水溶液溶解,不要一次将全部樣品都溶解掉。
1. 将酸性氨基酸Asp (D),Glu (E)和C端-COOH的值定爲(wèi)-1。
2. 将堿(jiǎn)性氨基酸Arg (R),Lys (K),His (H)的值定爲(wèi)+1。
3. 計(jì)算肽中全部電(diàn)荷量。
4. 如果肽的全部電荷爲正值,則肽呈堿性,可以先用水溶解。如果肽不溶於(yú)水,可以用10%乙酸或者更高濃度的乙酸溶解。如果肽一點都不溶,加入TFA(<50ml)助溶,並(bìng)用去離子水稀釋至1ml。
5. 如果肽的全部電荷爲負值,則肽呈酸性,可以先用水溶解。如果肽不溶於(yú)水,加入NH4OH(<50ml) 助溶,並(bìng)用去離子水稀釋至1ml。
6. 如果肽的全部電(diàn)荷爲0,則肽呈中性。中性肽需要用乙腈、甲醇、異丙醇等有機溶劑來溶解,也可以加入變(biàn)性劑(如尿素、鹽酸胍等)。
實例:KRLMKSIEVIMPL: (+4) + (-2) = +2。此條肽呈堿(jiǎn)性。見(jiàn)以上步驟4。
LVKMKSIEDPDCE: (+3) + (-5) = -2。此條(tiáo)肽呈酸性。見(jiàn)以上步驟5。