多肽廠家講述凍幹多肽的溶解

      1.多肽溶解的主要問題是二級(jí)結構(gòu)的形成。

      雖然疏水肽鏈二級結構的形成更明顯，但除最短的肽鏈外，此現象産(chǎn)生在幾乎所有肽鏈,與極性無關。所以，溶解多肽的第一個原則是使用無菌蒸餾水或去離子水，當(dāng)然無氧水最好。

      多肽溶液可能遇到細菌降解。爲防止此情況的發(fā)生，應溶解在無菌的蒸餾水中或用0.45或0.2孔徑的濾膜過(guò)濾除菌。

      含有 Cys、Met、Trp的多肽很容易氧化，應溶於(yú)無氧的水中。無氧水可通過(guò)注入惰性氣體（氮、氦、氩）減壓除氣得到。

     2.若多肽不溶於(yú)純水，超聲處理有助於(yú)打碎顆粒並(bìng)增加溶解度。注意:超聲處理會引起溶液發熱或多肽降解。

     3.若多肽含有多個堿性氨基酸，使用（1-10%）的乙酸水溶液：對(duì)於(yú)疏水性強的多肽，應使用50%的乙酸。

     4.若多肽中含有大量酸性氨基酸，可用氨溶液（1-10%）或乙酸乙基嗎啡或重碳酸鹽等揮發性的堿性緩沖(chōng)液溶解。PH值在層(céng)析前必須調整。

     5.異丙醇和乙腈能溶解中等大小的多肽。若肽要上柱，有機(jī)溶劑(jì)的量必須很少否則将嚴重影響停留時間。

     6. 若多肽因含有Val、Leu、Met、Phe、Tyr、Ala等芳炝鏈而高度疏水、或爲中性肽時，DMF或DMSO等模變(biàn)性劑的使用，有利於(yú)多肽的溶解。

      a.高濃度模變(biàn)性劑通過破壞多肽的二級結構(gòu)而助溶。

      b.膜變性劑适於(yú)多肽分析液的制備(bèi)，但可能會對其生物活性的研究工作造成幹擾。

      c.DMF是最佳變(biàn)性劑（最高濃度可達(dá)30%），滴加至多肽溶解。

      d.反相層(céng)析法時，DMF将與洗脫液前鋒(fēng)一起流出，根據入量的多少，峰值可能很高。大多數肽能在大量DMF流出後幾分鍾内流出，若肽鏈很小，洗脫太早，多肽的量将很低。

以上就是多肽廠(chǎng)家爲您講述的凍(dòng)幹多肽的溶解。