多肽的重建和操作
多數肽溶於(yú)無菌蒸溜水。初次溶解時,要注意使初始濃度比要求濃度大,如果多肽僅有限溶解性, 這便允許加入其它溶解劑或緩沖(chōng)鹽。
如果多肽在水中的溶解性有限,有幾(jǐ)種選擇可幫(bāng)助溶解:
對(duì)堿(jiǎn)性肽用稀乙酸(含Arg , Lys , His)
酸性肽用稀氨水(含Asp, Glu)
對(duì)極疏水的肽用10%有機(jī)修飾物(Acetonitnile , Methanol)
極(jí)不溶的肽用DM50或DMF
guanicline hydrochloride或脲的濃(nóng)溶液也很有用, 與上述方法合用, 聲處(chù)理也是溶解多肽的有效手段。
多肽的包裝
目錄中所有多肽除特别說明外,純度爲95~98%。包裝爲小瓶凍幹粉。 除特别注明外,多肽淨重包裝, 例如,1mg瓶的β-amyloid 1-40精確含1mg的多肽。多肽淨重由氨基酸分析得到的肽含量計算。例如, 一個多肽樣品毛重5mg,氨基酸含量85%, 多肽淨重爲5mg×0.85=4.25mg。請注意, 多肽含量不是多肽純度,與抗離子象乙酸鹽和溶劑,特别是水結合量合成多肽的本身特性。多肽純度可能達100%, 但合成品中多肽含量由氨基酸組成,硫水性, 和多肽對溶劑和離子的暴露決定,特别是在純化過程中, 無論多肽如何純,凍幹粉多肽含量一般爲70-85%。 剩餘15-30%由其它基本非肽成份構成。