溶解多肽是非常複雜的事情,一般很難一下子確定合适的溶劑。通常是先取一點試驗,在沒有確定合适的溶劑前千萬不要合部溶解。
下列方法有助於(yú)您選擇合适的溶劑(jì):
(1)判定多肽的電(diàn)荷特定,設定酸性氨基酸Asp(D),Glu(E)和C端COOH爲-1;堿性氨基酸Lys(K),Arg(R),His(H)及N端NH2爲+1,其它氨基酸的電(diàn)荷爲0。計(jì)算出将電(diàn)荷數。
(2)如果淨電(diàn)荷數>0,多肽爲堿性,用水溶解:如果不溶解或溶解性不大,加入醋酸(10%以上);如果多肽還不能溶解,加入少量TFA(25ul)溶解,然後(hòu)加入500ul水稀釋。
(3)如果淨電(diàn)荷數<0,多肽爲酸性,用水溶解;如果不溶解或溶解性不大,加入氨水(25ul)溶解,然後(hòu)加入500ul水稀釋。 (4)如果淨電(diàn)荷數=0,多肽爲中性,一般需要用有機溶劑如乙腈,甲醇或異丙醇,DMSO等溶解。還有人建議需要尿素來溶解疏水性很大的多肽。