按條件溶解多肽

若多肽不溶於(yú)純水，超聲處理有助於(yú)打碎顆粒並(bìng)增加溶解度。注意：超聲處理會引起溶液發熱和多肽降解。

若多肽中包含多個堿性氨基酸，使用1~10%的乙酸水溶液；對(duì)於(yú)疏水性非常強的多肽，則使用50%乙酸。

若多肽中含有大量酸性氨基酸，可用1~10%氨溶液或乙酸乙基嗎啡或重碳酸鹽等揮發性的堿性緩沖(chōng)液溶解。pH值在層(céng)析前必須調整。

異丙醇和乙腈能溶解中等大小的肽。若肽要上柱，有機(jī)溶劑(jì)的量則必須很少，否則将嚴重影響滞留時間。

若多肽因爲含有Val、Leu、Met、Phe、Tyr、Ala等芳烴側鏈而高度疏水，或爲中性肽時，DMF或DMSO等膜變(biàn)性劑的使用，有助於(yú)多肽的溶解。

a. 高濃度膜變(biàn)性劑通過破壞多肽的二級結構(gòu)而助溶。

b. 膜變性劑适於(yú)多肽分析液的制備(bèi)，但可能會對其生物活性的研究工作造成幹擾。

c. DMF是最佳變(biàn)性劑(最高濃度可達(dá)30%)，滴加至多肽溶解。

d. 反相層(céng)析時，DMF将與洗脫液前峰一起流出，依進樣量的多少，峰值可能很高。大多數肽能在大量DMF流出後(hòu)幾分鍾内流出，若肽鏈很小，洗脫太早，多肽的量将降低。 　

凍幹多肽的保存

　  所有标明“保持凍(dòng)幹”的産(chǎn)物，都必須保存在冰凍(dòng)條件下，最好-20℃，若保存在-10℃以下，大多數肽可維持幾年的活性。

當使用冰凍産品時，開蓋之前，瓶或試管應在裝有新鮮幹燥劑的幹燥箱内升至室溫。對於(yú)保存於(yú)-20℃的産品，這個過程需要一小時或更長，随包裝大小而異。否則，當瓶打開時，水氣進入導緻多肽凝縮而降低其穩定性。一旦打開，應迅速稱量完畢，並(bìng)立即密閉以免潮解，尤其親水肽更應注意。 　 

多肽溶液的保存 　 　 

　  多肽溶液比幹(gàn)粉的穩定性差很多，爲瞭(le)得到最好結果，遵循下列原則：

反複凍(dòng)融有損於(yú)肽的活性，所以建議分裝成小包裝保存。需要多少解凍(dòng)多少，用後棄掉剩餘物。

溶於(yú)pH5~7無菌的緩沖(chōng)液中，貯存於(yú)-20℃。

包含Cys、Met、Try、Glu、Asp的多肽易於(yú)氧化，因此須保存在無氧化劑的環(huán)境中。

由於(yú)細菌能降解多肽，因此貯存前必須過(guò)濾除菌。

凍(dòng)幹(gàn)多肽的溶解 　 

　  多肽溶解中的主要問題是二級(jí)結構(gòu)的形成。

雖然疏水肽鏈二級結構的形成更明顯，但除瞭(le)最短的肽鏈外，該現象發(fā)生在幾乎所有肽鏈，與極性無關。因此，溶解多肽的第一個原則是用無菌的蒸餾水或去離子水(如果條件允許則用無氧水)。

多肽溶液可能遇到細菌降解。爲避免該(gāi)現象的發(fā)生，多肽應溶解在無菌的蒸餾水中，或者用0.45或0.2µm孔徑的濾膜過濾除菌。

包含Cys、Met、Trp的多肽特别容易氧化，因此應該(gāi)溶於(yú)無氧的水中。無氧水可以通過注入惰性氣體(氮、氦、氩)減壓除氣得到。